Androctonus crassicauda (Oliver, 1807) Ham Zehirinin Kolon Kanseri Hücre Hattı (HT-29) Üzerindeki Bcl-2 ve Bax Genleri Expresyon Düzeylerine Etkisinin qPCR Yöntemi ile Belirlenmesi

Abstract

Giriş: Kolorektal kanser, dünya çapında en sık görülen malignitelerden biridir ve özellikle ileri evrelerde teşhis edildiğinde kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedenlerinden biri olmaya devam etmektedir. Doğal ürünlerden elde edilen yeni anti-kanser ajanların aranması giderek artan bir ilgi görmektedir ve akrep zehirleri, biyolojik olarak aktif bileşikler için umut vadeden bir kaynak olarak öne çıkmaktadır. Materyal ve Metodlar: Bu çalışma, Androctonus crassicauda (Oliver, 1807)’den elde edilen ham zehirin insan kolorektal kanser hücreleri üzerindeki in vitro sitotoksik etkilerini araştırmıştır. Deneysel model olarak insan kolorektal adenokarsinom hücreleri (HT-29) kullanılırken, kontrol olarak non-kanseröz insan embriyonik böbrek hücreleri (HEK293) kullanılmıştır. Bulgular: Hücre canlılığı MTT testi kullanılarak değerlendirilmiş ve yarı maksimum inhibitör konsantrasyon (IC??) değerleri HT-29 hücreleri için 40,54 mg/mL ve HEK-293 hücreleri için 57,30 mg/mL olarak belirlenmiştir. Apoptoz-ilişkili genlerin ekspresyon düzeyleri, kantitatif gerçek zamanlı PCR (qPCR) ile daha ayrıntılı olarak analiz edilmiştir. qRTPCR yöntemi kullanılarak yapılan gen ekspresyon düzeyleri analizi, Bax gen ekspresyonunun HT-29 hücrelerinde kontrol grubuna kıyasla yaklaşık 0,25 kat azaldığını, HEK-293 hücrelerinde ise yaklaşık beş kat arttığını göstermiştir. Benzer şekilde, Bcl-2 ekspresyonu HT-29 hücrelerinde yaklaşık 0,5 kat azalırken, HEK-293 hücrelerinde yaklaşık 2,5 kat artmıştır. Sonuç: HT-29 hücrelerinde gözlemlenen daha düşük IC?? değeri, Androctonus crassicauda ham zehirinin, kanserli olmayan hücrelere kıyasla kolorektal kanser hücrelerine karşı daha yüksek sitotoksik aktivite gösterdiğini göstermektedir. Apoptoza bağlı gen ekspresyonundaki gözlemlenen değişiklikler, zehirin hücresel ölüm yolaklarını modüle ettiğini düşündürse de, altta yatan moleküler mekanizmaları aydınlatmak ve bu etkilerden sorumlu biyoaktif zehir bileşenlerini belirlemek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Genel olarak, bu bulgular, A. crassicauda zehrinin yeni anti-kanser terapötiklerin geliştirilmesi için umut vadeden doğal bir biyoaktif molekül kaynağı olarak potansiyelini desteklemektedir.